胡萝卜离体根的培养
胡萝卜离体根的培养是一种在无菌条件下进行的植物组织培养技术,旨在通过诱导愈伤组织来再生完整的小植株。以下是该实验的基本步骤和所需材料:
实验材料
市售大而新鲜的胡萝卜
超净工作台
灭菌锅
显微镜
接种器械(如镊子、解剖刀、不锈钢打孔器)
培养皿
移液管
MS培养基
植物生长调节剂(如2,4-D和6-BA)
无菌水
消毒剂(如70%乙醇、0.1%升汞或次氯酸钠)
实验步骤
准备外植体
将胡萝卜用自来水冲洗干净,用刮皮刀除去表皮1-2mm,横切成约10-40mm厚的切片。
消毒处理
胡萝卜片经70%乙醇处理30秒后,用无菌水冲洗一遍,再用0.1%升汞或饱和漂白粉溶液浸泡10分钟,最后用无菌水冲洗3-5次。
打孔
将胡萝卜片平放于培养皿中,一手用镊子固定胡萝卜片,一手用打孔器按平行于组织片垂直轴方向打孔,每个孔应打在靠近维管形成层的区域,务必打穿组织。