胡萝卜离体根的培养

胡萝卜离体根的培养是一种在无菌条件下进行的植物组织培养技术,旨在通过诱导愈伤组织来再生完整的小植株。以下是该实验的基本步骤和所需材料:

实验材料

市售大而新鲜的胡萝卜

超净工作台

灭菌锅

显微镜

接种器械(如镊子、解剖刀、不锈钢打孔器)

培养皿

移液管

MS培养基

植物生长调节剂(如2,4-D和6-BA)

无菌水

消毒剂(如70%乙醇、0.1%升汞或次氯酸钠)

实验步骤

准备外植体

将胡萝卜用自来水冲洗干净,用刮皮刀除去表皮1-2mm,横切成约10-40mm厚的切片。

消毒处理

胡萝卜片经70%乙醇处理30秒后,用无菌水冲洗一遍,再用0.1%升汞或饱和漂白粉溶液浸泡10分钟,最后用无菌水冲洗3-5次。

打孔

将胡萝卜片平放于培养皿中,一手用镊子固定胡萝卜片,一手用打孔器按平行于组织片垂直轴方向打孔,每个孔应打在靠近维管形成层的区域,务必打穿组织。